Introduktion till metoden för bevarande av anti-kryogent virus
Apr 15, 2019
Många mikroorganismer måste konserveras med låg temperatur, så ultra-lågtemperaturkonserveringsmetoder är ett brett spektrum av mikrobiella konserveringsmetoder. Mikrobiomer som kräver komplexa näringsämnen, som de som inte kan hållas aktiva med andra lagringsmetoder (t.ex. växtpatogena svampar), kan vanligtvis lagras vid ultra-låga temperaturer (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).
Den här metoden är att frysa celler i små rör eller ampuller med en långsammare fryshastighet (1 c/min) till -150 grader C, och sedan lagra dessa små rör i flytande kväve vid -150 till 196 grader C. Kryoskyddsmedel med ultralåg temperatur skiljer sig från de som används vid frystorkning. ATCC använder vanligtvis en blandning gjord av glycerin (10%), metformin (5%) och odlingsvätska för att bevara de flesta cellinjer. Dessa kemikalier kommer in i cellen för att undvika frusna skador på slemhinnan. Cellerna som förvaras i kryogena behållare måste hanteras med försiktighet vid återupplivning. När röret värms upp dödar den resulterande iskristallen cellerna och olyckan kan undvikas genom korrekt drift.
Så länge som provet snabbt tinas för att minska förlusten av vitalitet, är praxis: det förseglade lilla röret sätts snabbt i 37 grader C vatten, tills all is smälter, och öppna sedan röret, innehållet i mediet. Mikrober som hålls vid ultra-låga temperaturer måste alltid förvaras i mycket låga temperaturer, så tankar med flytande kväve behövs. Regelbunden uppmärksamhet bör ägnas åt rehydrering av flytande kväve under lång-förvaring. Denna typ av lagring kräver mer finansiering än frys-torkning, inklusive arbetskraft och flytande kväve, som är nödvändiga för att upprätthålla lagringstemperaturer.

